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RNA
isolation Q&A |
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威健有 RNA Isolaton 的服務嗎
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| Ans.
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有，但是 RNA
Isolation service 需接續 Microarray
實驗 |
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客戶該如何準備sample ? |
| Ans.
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( 您可參照相關表單Total
RNA Isolation ) ：
Tissue：請將準備約重0.02g，其直徑約0.5公分的組織塊,將置於液態氮中，使快速冷凍，再將
sample 放入專門存放液態氮
sample 的管子(
cryovial ) 中，請您務必將檢體置於cryovial
中以降低實驗操作危險。
PS. 請客戶準備0.02g的組織塊即可，因為組織塊太大，操作時不易將組織塊從管中取出，在室溫中停留太久，而使其中RNA降解。
Cell line：準備106個細胞，並建議使用Trizol
reagent (Invitrogen #15596-018)並依照使用說明書，將您的細胞溶解後將其存放於-80度的環境中。 |
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如何將sample 交給威健 ? |
| Ans.
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客戶若以準備好sample，您可以電話通知威健,我們有專人前去取貨
( 限新竹以北 ) ，新竹以南請與本公司業務聯絡，我們會針對您的檢體狀況和您討論送件方式。 |
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一般進行 RNA QC 的方法有哪些﹖ |
| Ans.
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一般RNA的品質常用下列兩種方法測量：
a. OD260nm/ OD280nm
比例，一個純度高的RNA樣品比值應落在1.9-2.1之間。
| b. |
若樣品為total
RNA，則可以採1%
denaturing agarose gel 電泳分析28S
rRNA及18S rRNA的長度分布(如下圖)，其中28S
rRNA的位置相當於 ~4.5
kb，18S rRNA的位置相當於 ~1.9
kb。而除了28S及18S
rRNA有清楚的 band之外，膠體的電泳其他區域應沒有其他肉眼可見的rRNA片段分布 |
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威健 RNA QC 的方法﹖ |
| Ans.
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| 目前威健採用 Agilent
2100 Bioanalyzer 分析 total
RNA 樣品，其原理是利用毛細管電泳來分離 RNA，此方法的靈敏度及準確度皆較 OD260nm
/ OD280nm 比例及agarose
膠體電泳為佳。一個 RNA
完整度佳的樣品應如右圖： |
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